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              Sino Biological

              • 更新時間:  2023-07-26
              • 產(chǎn)品型號:  M293TI
              • 簡單描述
              • Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基
                規(guī)格:1000ml
                SMM 293-TI培養(yǎng)基適用于貼壁、懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關(guān)的細胞(如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT)的長期生長和瞬時轉(zhuǎn)染。
                SMM 293-TI含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份,無需添加任何添加物。
              詳細介紹

              Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

              產(chǎn)品描述:

              SMM 293-TI培養(yǎng)基適用于貼壁、懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關(guān)的細胞(如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT)的長期生長和瞬時轉(zhuǎn)染。

              SMM 293-TI含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份,無需添加任何添加物即可使用。其化學(xué)成分明確,主要包含細胞生長所需的無機鹽, HEPES, 碳酸氫鈉, 必需和非必需氨基酸, 維生素, 酚紅, 微量元素, PluronicÒ F-68和其他無機物(注意:此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清)。

              Sino Biological SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

              產(chǎn)品特點:

              • HEK293細胞瞬時轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基• 即用型*培養(yǎng)基,不用添加其他組分
              • 培養(yǎng)基批次間性能穩(wěn)定,同類產(chǎn)品性能更*• 無動物源組分,無血清,化學(xué)成分明確
              • 轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基• 上千蛋白表達成功案例
              • 適用于瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定株轉(zhuǎn)染以及培養(yǎng)• 適用于細胞的懸浮培養(yǎng)和大規(guī)模的反應(yīng)器培養(yǎng)

              SMM293-T1培養(yǎng)基,HEK293細胞培養(yǎng)基

               

               

              產(chǎn)品參數(shù):

              外觀澄清紅色溶液適用細胞株HEK293EBNA及相關(guān)的細胞(如HEK293F、HEK293T、HEK293H 、HEK293S、HEK293FT)
              滲透壓275±10 mOsm/kg細胞接種密度0.3-0.6×106 cells/mL
              pH值6.0–6.5倍增時間< 26 hrs(因細胞類型、狀態(tài)影響而存在數(shù)值變化)
              無菌檢測無菌細胞培養(yǎng)評價優(yōu)良
              內(nèi)毒素< 10 EU/mL產(chǎn)品用途僅用于科學(xué)研究,不推薦用于人類或動物的診斷和治療
              有效期6個月儲存條件2-8 ℃,避光
              SMM 293-TI培養(yǎng)基為澄清紅色透明液體,2~8℃避光保存,如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變得渾濁或出現(xiàn)沉淀,請勿使用。

              產(chǎn)品使用效果:

              細胞密度高
              SMM 293-TI培養(yǎng)基在HEK293T 的培養(yǎng)上更具優(yōu)勢。下圖從細胞生長曲線以及細胞活率兩個方面,展示了四種培養(yǎng)基對HEK293T細胞的培養(yǎng)效果,SMM 293-TI培養(yǎng)基明顯具有不亞于國外的質(zhì)量。
              cell-culture-in-SMM-293-T1
              成功表達多種重組蛋白質(zhì)
              SMM 293-TI 成功應(yīng)用于多種重組蛋白質(zhì)的表達生產(chǎn),獲得上千個高品質(zhì)的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。其中一種Fc標簽融合蛋白的產(chǎn)量高達2.5g/L。
              protein-production-in-SMM-293-T1

              產(chǎn)品使用方法:

              細胞復(fù)蘇:
              1. 迅速取出凍存的細胞,在37 ℃水浴條件下進行解凍(可以在水中輕輕晃動,時間控制在30s以內(nèi));
              2. 輕輕地混勻細胞并將融化的細胞全部移至50 mL無菌離心管中,逐滴加入10 mL預(yù)熱到37℃的培養(yǎng)基,離心換液(100 g,3 min)去除全部上清,加入293新鮮培養(yǎng)基重懸,使得細胞密度達到0.4~0.6×106cells/mL;
              3. 將細胞置于37℃,5%CO2,轉(zhuǎn)速為110~175rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng);
              4. 2-5天后通過人工或儀器測定細胞的密度以及活率,如果細胞密度達到1.0×106cells/mL,活率85%以上則可進行傳代培養(yǎng);
              5. 如果細胞密度低于1.0×106cells/mL,則建議對細胞進行離心(100g,5min),然后重懸于20-30mL 的新鮮培養(yǎng)基中使得細胞密度為0.6×106cells/mL 左右,并繼續(xù)培養(yǎng)至細胞正常生長則可進行傳代培養(yǎng)。
              細胞轉(zhuǎn)染:
              SMM 293-TI培養(yǎng)基中,用Sinofection®轉(zhuǎn)染試劑(貨號STF01),可以實現(xiàn) HEK293 細胞的高轉(zhuǎn)染效率。具體細節(jié)可以參考Sinofection® 轉(zhuǎn)染試劑說明書。
              細胞馴化:
              懸浮的HEK293 cells幾乎不用馴化就可直接適應(yīng)SMM 293-TI培養(yǎng)基。如果直接更換培養(yǎng)基失敗則推薦下面兩種方式來馴化HEK293細胞使其適應(yīng)SMM 293-TI培養(yǎng)基:1)直接馴化;2)逐步馴化。
              1)直接馴化:
              1. 將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里的細胞,直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中,細胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL;
              2. 將細胞置于37 ℃,5% CO2,轉(zhuǎn)速為110~175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng);
              3. 4~6天后對細胞培養(yǎng)液進行稀釋(或者離心更換上清),保持稀釋(或者離心)后細胞密度為0.3~0.4×106cells/mL;
              4. 經(jīng)過在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×106cells/mL,細胞活率大于90%。這說明細胞已經(jīng)*適應(yīng)了SMM 293-TI培養(yǎng)基,之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時,細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106/ml左右。
              注意:如果直接馴化效果欠佳,可采用逐步馴化的方法。
              2)逐步馴化:
              1. 將培養(yǎng)在加有5~10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里的細胞,直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養(yǎng)基中,細胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL,原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為75:25;
              2. 將細胞置于37℃,5%CO2,轉(zhuǎn)速為110-175rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng);
              3. 4~6天后進行傳代,如果細胞生長狀態(tài)良好,且活率>90% 則傳代時原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為50:50,細胞密度仍控制在0.3~0.4×106cells/mL。如細胞生長慢,可離心上清,留20%原培養(yǎng)基,加入80% 的新鮮SMM 293-TI培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng);
              4. 重復(fù)步驟3逐步增加SMM 293-TI培養(yǎng)基所占的比例(原培養(yǎng)基與SMM 293-TI培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90)直到100%的SMM 293-TI培養(yǎng)基;
              5. 經(jīng)過在100%的 SMM 293-TI培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×106cells/mL,細胞活率大于90%。這說明細胞已經(jīng)*適應(yīng)了SMM 293-TI培養(yǎng)基,之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時,細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106cells/mL。

               


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