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              invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III SuperScript

              • 更新時(shí)間:  2023-07-27
              • 產(chǎn)品型號(hào):  18080-044
              • 簡(jiǎn)單描述
              • invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III SuperScript?,逆轉(zhuǎn)錄酶3
                應(yīng)用:*鏈cDNA 合成、陣列標(biāo)記、cDNA 文庫(kù)、RT-PCR、引物延伸和3′ 和5′ RACE。
                規(guī)格:10000U
                來(lái)源:純化自表達(dá)M-MLV 的pol 基因的大腸桿菌(1,2),通過(guò)突變?cè)黾恿藷岱€(wěn)定性和半衰期,降低了RNase H 活性。
                庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
              詳細(xì)介紹

              invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III SuperScript?,逆轉(zhuǎn)錄酶3

              SuperScript III 反轉(zhuǎn)錄酶(RT) (SuperScript III Reverse Transcriptase (RT)) 是SuperScript II RT 的專有突變體,在50°C 具有活性,半衰期為220 分鐘,使用基因特異性引物(GSP) 提高特異性,在所有RT 中cDNA 產(chǎn)量zui高。如果要進(jìn)行特定基因的RT-PCR 或從總RNA 或poly (A)+ RNA 樣品生成cDNA,該產(chǎn)品十分理想。和SuperScript II 一樣,它可以從單鏈RNA、DNA 或RNA:DNA 雜合體合成互補(bǔ)DNA 鏈。通過(guò)引入點(diǎn)突變對(duì)SuperScript III RT 進(jìn)行遺傳改造,這些點(diǎn)突變可以增加半衰期、降低RNase 活性并增加熱穩(wěn)定性。進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后: 

              • 50°C 時(shí)半衰期為220 分鐘,獲得zui高的cDNA 產(chǎn)量(圖1)
              • RNase H 活性降低,獲得更多全長(zhǎng)cDNA
              • 在50°C 有zui大活性,用GSP 增加特異性
              • 能增加RT 單位而不抑制后續(xù)的PCR

              invitrogen反轉(zhuǎn)錄酶III SuperScript?,逆轉(zhuǎn)錄酶3

              性能和質(zhì)量測(cè)試:SDS-PAGE 純度;脫氧核糖核酸內(nèi)切酶、脫氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析(圖2)及cDNA 產(chǎn)物的產(chǎn)量和長(zhǎng)度。

              單位定義:一個(gè)單位的SuperScript? III RT 是在37°C 的反應(yīng)體系中,使用poly(A)?oligo(dT)12-18 作為模板?引物,在10 分鐘內(nèi)將1 納摩爾脫氧核糖核苷酸摻入酸沉淀材料所需的酶量(3)。

              單位反應(yīng)條件:50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。0.5 更看更多mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶,共50 μl,溫度37°C,時(shí)間10 分鐘。
               

              ?,逆轉(zhuǎn)錄酶3

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